期刊简介

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  • 杂志名称:实用中西医结合临床杂志
  • 主管单位:江西省卫生厅
  • 主办单位:江西省中医药研究院,江西省中西医结合学会
  • 国际刊号:1671-4040
  • 国内刊号:36-1251/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
实用中西医结合临床杂志2015年第12期

MicroRNA-21调控口腔鳞癌细胞顺铂耐药及其作用机制

陈建萍;王萍;杨庚萍;欧阳少波;黄自坤

关键词:口腔鳞癌, 微小RNA-21, 顺铂, 耐药, 人第10号染色体缺失的磷酸酶
摘要:目的:探讨microRNA-21 (miRNA-21)在人口腔鳞癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制.方法:采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测miRNA-21在口腔鳞癌细胞株Tca8113及顺铂耐药细胞株Tca8113/DDP的表达;采用体外转染法将miRNA-21模拟物(mimics)或抑制物(inhibitor)分别转染Tca8113和Tca8113/DDP细胞,采用RT-PCR检测转染前后细胞中miRNA-21的表达情况;采用CCK8实验检测转染前后细胞对顺铂敏感性的变化;并用Western blot检测转染前后细胞中PTEN的表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miRNA-21是否作用于PTEN基因的3'-UTR区预测靶位.结果:miRNA-21在Tca8113/DDP细胞中的表达水平是Tca8113细胞的(8.26± 1.37)倍(P<0.01).Tca8113细胞转染miRNA-21 mimics后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(10.51±2.18)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显下降(P<0.05).Tca8113/DDP细胞在转染miRNA-21 inhibitor后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(0.32± 0.14)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113/DDP细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显增高(P<0.05).经双荧光素酶报告基因验证PTEN是miRNA-21的靶基因.结论:miRNA-21在口腔鳞癌顺铂耐药细胞Tca8113/DDP中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,miRNA-21可能通过作用于PTEN参与口腔鳞癌细胞顺铂耐药的发生和发展.